*細胞-英瀚斯生物科技-雅安細胞
4. 各種細胞對凍存速度的要求也不一樣;上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些,-2~-3℃/ 分鐘合適;胚胎細胞耐受性較小,不宜太快??傊谝婚_始時,下降速度不能超過-10℃/ 分鐘。
5. 用什么防護劑合適和用量多大,*細胞,要依細胞而定,初代培養(yǎng)細胞用 dmso 較好,一般細胞可用甘油;用量以較小為好。有人認為膚上皮細胞貯存在 20%-30% 甘油中很好。
6. 原則上細胞在液氮中可貯存多年,但為妥善起見,凍存一年后,應再復蘇培養(yǎng)一次,然后再繼續(xù)凍存。
7. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免
8. 注意自身的安全,對于來自人源性或病毒的細胞株應特別小心。操作過程中,應避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心*性*例如 dmso,并避免尖銳物品傷人等。
細胞生物學服務
南京英瀚斯生物科技公司自建有標準的細胞培養(yǎng)房,配備有生物安全柜、超凈工作臺、細胞三氣培養(yǎng)箱、二氧化碳細胞培養(yǎng)箱、熒光倒置顯微鏡、體視鏡、、流式細胞儀等設備。細胞組技術人員畢業(yè)于東南大學、華中科技大學等高校生物學相關,具有碩士研究生以上學歷,細胞毒性實驗,熟練掌握細胞學相關實驗,可開展多種細胞實驗。動物實驗外包選英瀚斯生物科技有限公司。
細胞培養(yǎng)中常見的污染及解決方法
霉菌污染
正常情況下,培養(yǎng)基在 37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩三天,在倒置顯微鏡下仍保持透明,無雜質。一旦出現(xiàn)絮狀雜質,顯微鏡下可見絲狀和團塊狀*浮物,菌絲明顯。此時,雖然細胞仍在生長,但它們的生命狀態(tài)會在長時間后逐漸惡化。
解決方法:用*銅溶液擦拭 co2 培養(yǎng)箱,向托盤中加入飽和*銅或消毒后加入飽和*氫二鈉高鹽溶液,避免霉菌污染。
如果霉菌污染,暫時轉移所有細胞,流式細胞檢測,并立即使用 guo 氧擦拭培養(yǎng)箱,雅安細胞,包括層板和內壁。將 guo 氧放在培養(yǎng)箱中一小時,使蒸汽擴散,待 guo 氧氣味消散后,將細胞轉移到培養(yǎng)箱中。值得注意的是,培養(yǎng)箱需要每兩個月定期清洗一次,尤其是在梅雨季節(jié)。用 84 消毒液、清水和 75% 酒精連續(xù)擦拭培養(yǎng)箱,用紫外線照射也是一種有效的方法。
為防止霉菌污染,需添加 3μg/ml 、*素、fang
線菌素 d 或青鏈。一旦被污染,就不可能恢復,即使使用上述,也沒有什么區(qū)別。對于支原體污染的細胞培養(yǎng),選擇是丟棄污染的培養(yǎng)物,并用使用新鮮的無支原體的儲存液,消毒環(huán)境。如果所有的細胞都被污染了,那可能是整個培養(yǎng)系統(tǒng)污染了。因此,必須對培養(yǎng)基和實驗設備進行檢查。如果只是個別污染,可能是操作問題,有必要注意實驗操作步驟的規(guī)范。
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